在RoHS 2.0鄰苯二甲酸酯(DEHP、DBP、BBP、DIBP)檢測中，高效液相色譜儀(HPLC)的分離效果直接受流動相組成影響。優化流動相是提升分離度、縮短分析時間的關鍵。
鄰苯為弱極性化合物，通常采用反相色譜柱(C18)，流動相由水相(A)與有機相(B)組成。常用有機相比例為甲醇或乙腈。研究表明，乙腈體系比甲醇具有更低粘度和更高洗脫強度，可獲得更尖銳峰形和更好分離度，尤其對結構相近的DBP與DIBP。典型梯度程序：初始60%乙腈，5分鐘內升至90%，保持3分鐘洗脫。
緩沖鹽的添加亦不可忽視。加入5–10 mM乙酸銨可抑制鄰苯在硅膠表面的次級相互作用，減少拖尾，提升峰對稱性。但濃度過高易堵塞系統，且需使用質譜兼容鹽類。
此外，pH控制影響不大(鄰苯無電離基團)，但水相純度至關重要——雜質可能干擾低濃度目標物檢測。建議使用HPLC級溶劑，并在線脫氣。
實驗表明，將甲醇替換為乙腈后，四種鄰苯的分離度(Rs)從1.2提升至1.8以上，全部滿足IEC 62321-8:2017要求(Rs≥1.5)。同時，優化后的梯度可將分析時間從15分鐘壓縮至8分鐘，顯著提升通量。
綜上，流動相選擇需綜合考慮分離效率、系統壓力、檢測靈敏度及法規符合性，通過系統性梯度試驗確定較佳配比。
